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甲醇固定细胞步骤

2025-05-30 化工产品网

甲醇固定细胞是一种常用的细胞处理方法,通过甲醇处理可以使细胞膜固定,细胞结构稳定,保护细胞内的蛋白质和核酸不被破坏。下面简单介绍甲醇固定细胞的步骤。

第一步:选取需要处理的细胞。通常,甲醇固定细胞适用于各种细胞类型,但对于不同的细胞类型,处理时间和甲醇浓度也会有所不同。因此,在实验前需要确定固定时间和浓度。

第二步:将细胞转移到离心管中,并加入足够的冷甲醇使细胞完全浸泡在其中,一般固定时间为10-15分钟。固定时间过长会导致细胞失去活性,过短则会导致细胞结构不稳定。

第三步:取出离心管,倒出甲醇,加入PBS等缓冲液进行洗涤,去除多余的甲醇。洗涤次数一般为3-4次,每次洗涤的时间为5分钟左右。

第四步:加入适量的抗体或荧光染料,如DAPI、FITC等,进行染色或免疫标记。标记时间和浓度需要根据实验需要进行确定。

第五步:再次进行洗涤,去除多余的抗体或荧光染料。

第六步:将细胞转移到载玻片上或者离心管中,加入适量的封片液或透明胶进行封片,然后放在显微镜下观察。

甲醇固定细胞是一种简单、易行、有效的细胞处理方法,能够有效保护细胞结构,为细胞形态学和免疫学研究提供了重要的技术支持。


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